评估使用Miana叶片的乙醇提取物制备纳米颗粒软膏的抗菌活性(Coleus Atropurpureus(L.)Benth)

文件类型:原始研究文章

作者

印度尼西亚东雅加达,IKIFA药房学院药房

抽象

目标:即使是在单一状态或软膏制备中,也可以将Miana叶的纳米颗粒形式与其提取物进行比较。因此,获得了使用配对T检验的SPSS程序以了解它们之间的差异。
方法:本研究中使用的方法是实验,尝试将提取物的形式更改为纳米颗粒并进行比较。离子玻璃法将聚丙烯酸(PAA)和氯化钙混合后可以改变Miana叶片的大小’乙醇提取物为纳米颗粒,平均粒径为89.77 nm。相等性表明,2.5%的Miana叶片与1.17%的纳米颗粒。
结果:结果表明,麦叶的乙醇提取物对金黄色葡萄球菌,大肠杆菌,铜绿假单胞菌均具有抗菌活性。经过验证的纳米颗粒形式可以提高稳定性和药物稳定性’的管理。在药物给药系统中,纳米颗粒通过将药物溶解,捕获,包封和附着在基质中而具有作为载体的功能。然后,通过使用离子玻璃法将聚丙烯酸和氯化钙混合,将形成纳米颗粒。
结论:这项研究表明,Miana叶提取物的纳米软膏是安全的,并且不会刺激皮肤。

关键词


介绍

由于其治疗和药物治疗的高昂费用,感染性疾病的患病率仍然很高。因此,它导致一些专家将他们的知识投入到配制感染性疾病的草药中,使社会各阶层都可以使用该药物[1]。在这种情况下,抗菌药物的开发被视为药物领域发展的重要关键,因为它对治疗感染,改善生活质量和医学领域以及制药行业都是有效的[2]。

如今,社会上使用了许多传统药物,但研究并未支持这种药物。因此,有必要进行旨在了解传统医学益处的研究[3]。玛丽安娜(紫菜彩叶 [L.] Benth)被描述为观赏植物,可以用作来自东南亚的传统药物。 米安娜叶片的形状和颜色各不相同,其中一种具有药效的是棕红色的叶片[4]。薇娜叶具有黄酮类,多酚,单宁,皂角苷,生物碱,咖啡酸,迷迭香酸,对香豆酸,没食子酸,槲皮素,乙酸乙酯,甲基丁香酚,丁香酚,百里香酚,苯酚,香芹酚,植物甾醇,矿物等化学化合物和精油[5,6,7]。通常,Miana叶片通过煮沸叶来经验性地被社会消费,并用于饮用。实际上,Miana叶有许多好处,例如可用于煮沸,耳和眼睛发炎药,同时其根可用于腹泻和胃痛药[8,9]。

类黄酮通常是由植物在与微生物感染反应后合成的,因此,黄酮类化合物是否可以有效地对各种类型的微生物产生抗菌作用是很普遍的。 体外。此外,据报道其他物种也具有抗菌活性[10、11、12、13]。具有抑菌活性的几种类黄酮为芹菜素,高良姜精,黄酮,类黄酮糖苷,异黄酮,黄烷酮和查耳酮[14]。

根据先前的研究,Miana离开了’乙醇提取物具有抗菌活性, 大肠杆菌金黄色葡萄球菌 and 铜绿假单胞菌。此外,它可以以浓度为40%的纳米颗粒的形式用于治愈兔子的感染伤口[15,16]。

因此,本研究旨在了解乙醇提取物的Miana叶的纳米形式是否优于提取物,即使是单剂或软膏制剂也是如此。 大肠杆菌 和 金黄色葡萄球菌.

材料与方法

用料

本研究中使用的植物是Miana树叶(锦紫苏 scutellarioides [L.] Benth)是由印度尼西亚茂物植物,香料和医学实验室产生的。之后,在茂物印度尼西亚科学院茂物植物园中央植物保护中心进行植物分类。

除了Miana树叶外,还使用了多种材料,例如蒸馏水。聚丙烯酸(Sigma Aldrich);氯化钙(Merck); Avicel PH 102(Bratachem);氯酸(Merck);氢氧化钠(Merck);营养琼脂(Merck); ept肉汤(默克); 金黄色葡萄球菌 ATCC 25923; 大肠杆菌 ATCC 29322;氯霉素(Bratachem);液体石蜡(Bratachem);对羟基苯甲酸甲酯(Merck);尼泊金丙酯(Merck);酒精(Bratachem)。

此外,所使用的工具包括均质机(香台);传播能力测试工具;分析秤(AND GR-200);接种环酒精灯层流气流(Gelman Sciences);分光光度计UV-Vis;高压灭菌器(平假名);烤箱(Memmert);培养皿;试管; 9孵化器(Memmert);涡流(Thermolyne);布鲁克菲尔德粘度计(DV-II + Pro);粒度分析仪(DelsaNanoTM值 ); 喷雾干燥器(Buchi喷雾干燥器B-190); pH值计(PHM201);显微镜载玻片搅拌器干燥器;电磁搅拌器(Cimarec-2);卡尺(TRICLE);微量移液器水浴;硅胶60 F254 nm。

方法

安娜叶提取

将已经干燥的Miana叶用搅拌机粉化。然后,用60号筛子过筛,并用浸软法提取。之后,将250克辛普利亚粉末形式的Miana叶片放入广口瓶中,在24小时内用96%乙醇溶解900毫升的水浸泡并过滤。然后向剩余的果肉中加入96%的乙醇溶解物(300 ml)。重复浸软法3次,以使罐装总量为1,8升,浸软时间为4天。在这项研究中,使用的罐子是8个罐子,因此总数为14,4升。然后将所有滤液用旋转蒸发器真空浓缩。

提取物表征/感官测试

感官测试或提取物表征包括在特定参数中,旨在描述可通过感测确定的形状,颜色,气味和风味。此外,它的目的是作为对主观提取的第一个介绍。

PAA和氯化钙的纳米叶提取物纳米粒子制备

使用合适的溶剂溶解大量的Miana叶片,然后加入0.1%的PAA(20毫升)和蒸馏水至40毫升。使用磁力搅拌器以400 rpm的速度搅拌3分钟。然后,通过添加氢氧化钠直至pH达到8来进行pH调节。如果pH超过8,则需要添加氯酸并滴加氯化钙直至形成浑浊。

纳米颗粒表征

纳米颗粒表征涉及观察大小和Miana叶提取物。粒度分析仪用作工具。

使用菊苣叶提取物制备软膏

本研究中使用的软膏基质是碳氢化合物基质[17]。然后,将液体石蜡与白色凡士林混合并搅拌直至凡士林融化(M1)。然后,使用96%的乙醇溶解对羟基苯甲酸丙酯和对羟基苯甲酸甲酯,并添加Miana叶提取物(M2)。一旦M1变凉,就使用均质器混合M2。

抗菌活性测定

100μ将L种细菌悬浮液添加到20 ml无菌营养琼脂中,然后旋转至均匀。为了使细菌悬浮液相等,因此将其倒入培养皿中,并左右旋转。琼脂浓缩后,用钻头钻四个孔。然后,将Miana叶提取物,使用Miana叶提取物的纳米颗粒软膏,乙醇中的氯霉素阳性对照4 mg / ml以及软膏的阴性对照倒入孔中。在层流中无菌获得,在35º-37ºC持续24小时。孔周围的透明区域显示存在细菌抑制区,并使用卡尺进行测量。

统计分析

由于需要参数测试,因此评价了Miana叶提取物活性,Miana叶提取物纳米颗粒的数据以及软膏制剂的评估,包括粘度,铺展能力,pH和软膏制剂活性,以评估其正常性。如果数据被认为是正常的,则由于样本之间存在相似性,因此进行了配对样本t检验。通过使用配对样本t检验,可以将Miana叶与纳米颗粒的形式进行比较。还获得了统计分析,以了解Miana叶提取物与纳米颗粒Miana叶提取物之间的显着性差异,以0.05为显着值。

决策:

一种。如果显着值(2尾)<0,05,因此Miana叶提取物和使用Miana叶提取物的纳米粒子之间存在显着差异。

b。如果显着值(2尾)>0,05,因此Miana叶提取物和使用Miana叶提取物的纳米颗粒之间没有差异。

结果

安娜叶提取物的制备

用90%的乙醇溶解浸入2公斤的Miana叶片,溶解总量为14,4升。此外,浓缩后获得的浓缩提取物约为210.97克,产率为10.54%,DER-native为9.48%。

通过计算产率可以知道提取物在简单粉中所占的百分比。同时,DER-native计算知道生产1克提取物需要多少(即克)简单粉。

感官提取物测定

感官提取物测定的结果可见下表1。结果表明,提取物的形状较厚,有黑色,有芳香气味,通过感测观察到有苦味。

PAA和氯化钙制备纳米颗粒的菊苣叶提取物

加入100克Miana叶子提取物,其中96%的酒精为15ml,0.5%的PAA为5ml,丙二醇为15ml,蒸馏水至50ml。然后,使用磁力搅拌器以400 rpm的速度搅拌3分钟。通过添加氢氧化钠直到达到pH 8来调节pH,但是如果pH大于8,则将添加氯酸。滴加氯化钙,直到浑浊变得均匀为止。然而,在约15分钟内,形成的纳米颗粒没有变化。在此,表2展示了使用Miana树叶提取物溶解5天内的纳米颗粒的结果观察结果,包括颜色,浊度和沉淀物。

纳米颗粒表征测定

根据使用粒度分析仪DelsaNano进行的测量 TM值 ,可以得出结论,由于其在10-1000 nm范围内仍达89,77 nm,Miana叶提取物已满足纳米颗粒的要求。

用Miana叶提取物配制含抗菌药膏的纳米颗粒

使用Miana叶子提取物粉末,2.5%Miana叶子提取物的当量值为约1.17%纳米颗粒,因此基于表4获得的公式。

抗菌活性测试

获得抑制直径评估的目的是了解可以防止细菌繁殖的浓度 大肠杆菌  S. aureus。在20%,40%和80%的浓度下,琼脂培养基中有一个清晰的区域,其中包含 金黄色葡萄球菌 and 大肠杆菌 菌。因此,Miana叶提取物对 大肠杆菌  S. aureus.

从上表可以得出结论,Miana叶提取物的浓度增加会影响细菌的净区直径,Miana叶提取物具有很强的抗菌力[18]。这是由于对 金黄色葡萄球菌 and 大肠杆菌 抑制直径为10-20毫米。

安娜叶提取物活性抑制细菌的生长革兰氏阴性 大肠杆菌 比细菌革兰氏阳性更敏感 金黄色葡萄球菌。这是由于两种细菌的​​细胞壁结构不同所致。革兰氏阳性细菌细胞壁包含厚而刚性的肽聚糖层和Teikoat酸。同时,革兰氏阴性菌’细胞壁由一层以上的肽聚糖薄层和肽聚糖层外的膜组成。革兰氏阴性细菌的细胞壁仅是少数的肽聚糖层,并且不含甲壳酸,因此它对细菌或其他抗菌药物的敏感性更高[19]。

含有Miana叶提取物的化合物在提供 抗菌活性。较高的miana叶提取物浓度,因此将导致区域直径更清晰。此外,它表明具有更多抗菌活性的化合物越多,则抑制直径越好。

用Miana叶提取物和纳米颗粒Miana叶提取物制备的软膏制备物在兔皮肤上的刺激性测试结果显示,在3天的观察中没有红斑或水肿。因此,可以确定的是,Miana叶提取物软膏和使用Miana叶提取物的纳米粒子由于不会引起刺激,因此可以安全地用于皮肤。

讨论

使用Miana叶提取物测试获得了纳米颗粒,以确保Miana叶提取物粉末在干燥过程后仍具有抗菌活性。此外,该测试还获得证明纳米颗粒形成更有效的方法,因为药物的给药足够好。

以前,已经有人说,Miana叶片提取物的含量为2.5%,而纳米颗粒粉末的含量为1.17%。

结果表明,在相同浓度下,纳米颗粒粉末的抑菌直径大于提取物。使用的阴性对照是丙二醇,96%的酒精和水,对比为15:15:15。之后,使用的阳性对照是96%的氯霉素4 mg / ml乙醇。

感官

感官检查结果表明,不含活性成分的软膏基质或软膏样品呈白色,半固体状且在5周内无香气。然后,使用Miana叶提取物制成的纳米颗粒软膏在5周内具有浅棕色,半固体和香气的特征。然而,与Miana叶子提取物软膏不同的是,它具有深棕色的颜色和Miana叶子的典型香气。

在这种情况下,与Miana叶提取物相比,使用Miana叶的纳米颗粒软膏效果更好。这是因为香气和颜色不太深。

同质性

三个配方在5周内的均质性测试表明,软膏基质,纳米颗粒软膏和Miana叶提取物软膏没有显示出均匀性的任何变化。

pH值

软膏制剂的pH预期在pH 4,5-6,5范围内,因此不会损坏位于角质层的酸性涂层,该涂层具有保护皮肤免受酸和碱物质侵害的功能。此外,酸还可以抑制皮肤上有害微生物的生长。

所有配方均在5,28-5,99之间,因此仍在预期范围内,不会损坏皮肤上的酸性涂层。使用配对样品T检验评估纳米颗粒和提取物配方之间的pH值,因为相同样品的数据正态分布,而

不同的数据。获得的数据说明,由于显着性值(2尾)小于0.05(0.000),因此pH提取物与pH纳米颗粒提取物之间存在显着差异。<0,05)。因此,可以得出结论:使用Miana叶提取物的软膏的pH与使用Miana叶提取物的纳米颗粒的pH之间存在显着差异。

粘度和流动性测量

一种。黏度

粘度测定以rpm 1进行; 2; 2,5和4,使用25号纺锤。通常,每个配方的粘度都会增加,可观察4周。在第五周,该制剂的粘度降低但不降低太多。

使用配对样品T检验进行统计分析的结果证实,使用Miana叶提取物的软膏粘度与使用Miana叶提取物的纳米颗粒软膏的粘度之间存在差异,其中显着值(2尾)小于0,000 0,05。

使用Miana叶提取物含有纳米颗粒的软膏粘度具有最高的粘度。这是由于较小的粒径会引起软膏制剂的增加’s viscosities.

b。流动性

所有软膏的流动性测定均显示为Bingham Bodies,其中曲线未通过屈服0,0,而是剪切了屈服值上的剪切应力。屈服值被描述为使液体开始流动应满足的值。在这种情况下,在通过屈服值之前,本质是弹性材料的形式。但是,在通过屈服值之后,系统基于牛顿系统流动,其中剪切应力与剪切速率成比例。

传播能力

铺展能力受粘度的影响很大,其中粘度越高,铺展能力越小。在三种软膏制剂中显示,使用Miana叶提取物的纳米颗粒软膏比其他软膏小。

配对样品T-Test的结果表明,Miana叶提取物与使用Miana叶提取物的纳米颗粒之间存在显着差异,显着值(2尾)小于0.05。

结论

  1. 最小的Miana叶片抑制浓度’乙醇提取物抑制细菌生长 金黄色葡萄球菌 and 大肠杆菌 浓度为2.5%。
  2. 聚丙烯酸(PAA)和氯化钙之间的混合可以改变Miana叶片’用离子玻璃法将乙醇提取物制成直径为89.77 nm的纳米粒子。
  3. 使用Miana叶提取物,有2,50%的Miana叶提取物等于1,17%的纳米颗粒。
  4. 可以将Miana叶子的乙醇提取物配制成具有浅棕色,香气,pH值为5,80-5,94,铺展能力为9.65-10.28 cm的烃基软膏,并具有宾厄姆酒体的特性。
  5. 在相同浓度下,使用Miana叶提取物的纳米颗粒比提取物具有更好的抗菌活性 金黄色葡萄球菌 细菌(14,43毫米/ 14,03毫米)和 大肠杆菌 (16,93 mm / 15,25 mm)以及在药膏准备中朝 金黄色葡萄球菌 细菌(14,46毫米/ 13,58毫米)和 大肠杆菌 (14,59毫米/ 13,75毫米)。
  6. 因此,从刺激性测试中获得了Miana纳米颗粒的叶子’乙醇提取物是安全的,不会引起刺激。

利益冲突

作者声明,有关此手稿的出版没有利益冲突。

1. Kumala S,Tambunan RM,Mochtar D. Uji aktivitas anti-bakteri ekstrak etil asetat kembang pukul empat(mirabilis jalapa l。)dengan metode bioautografi。 JFIOnline |打印ISSN 1412-1107 |电子ISSN 2355-696X。 2006; 3(2)。
2. Arini S,Nurmawan D,Alfiani F,Mulyani S. Uji Aktivitas Antifungi Minyak Atsiri Daun Beluntas Terhadap白色念珠菌Dan Pembuatan Sediaan Yang Sesuai。 JFIOnline |打印ISSN 1412-1107 |电子ISSN 2355-696X。 2006; 3(2)。
4. ANS T. Tanaman obat tradisional II。日惹:卡尼修斯。 1992:9-10。
6. Winarto WP。 Tanaman obat印度尼西亚untuk pengobatan草药。 Karyasari Herba Media。 2007; 124。
7.印度尼西亚的Wijayakusuma H. Tanaman berkhasiat obat di。 Pustaka Kartini; 1996年。
11. Mishra A,Kumar S,Bhargava A,Sharma B,Pandey AK。一些重要药用植物的体外抗氧化和抗葡萄球菌活性的研究。细胞分子生物学。 2011年2月12日; 57(1):16-25。
12. Pandey AK,Mishra AK,Mishra A,Kumar S,ChandraA。玉米。提取物的治疗潜力:抗真菌和抗氧化剂的观点。国际生物医学杂志。 2010; 1(4):228-33。
14. Mpila D,Fatimawali F,Wiyono W. Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Mayana(Coleus atropurpureus [L] Benth)terhadap金黄色葡萄球菌,大肠杆菌dan Pseudomonas aeruginosa secara体外。 Pharmacon。 2012年8月1日; 1(1)。
15. Marpaung PN。 Uji Efektivitas Sediaan Salep Ekstrak Daun 米安娜(Coleus scutellarioides [L] Benth。)Untuk Pengobatan Luka Yang Terinfeksi Bakteri 金黄色葡萄球菌 Pada Kelinci(穴ct)。 Pharmacon。 2014; 3(3)。
17.Naibaho OH,Yamlean PV,Wiyono W.Pengaruh基础塞拉普·塞哈达普公式,塞迪亚安·塞拉普·埃克斯特拉克·达恩·科曼吉(Ocimum sanctum L.) Pharmacon。 2013年5月1日; 2(2)。
18,戴维斯(St.微生物抗生素测定的圆盘法:I.影响变异性和误差的因素。应用环境。微生物..1971年10月1日; 22(4):659-65。
19. Radji M. Mikrobiologi。 Buku Kedokteran ECG,雅加达。 2011。