DNA安徽福彩网管与磁性安徽福彩网粒子耦合作为比色生物传感器的平台。

文件类型:原始研究文章

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1 Mazandaran医科大学医学先进技术学院医学安徽福彩网技术系,伊朗萨里,Mazandaran医科大学糖尿病研究中心,伊朗萨里

2 萨班奇大学安徽福彩网技术研究与应用中心,土耳其萨班奇

3 Mazandaran医科大学医学先进技术学院医学安徽福彩网技术系,伊朗萨里

4 Mazandaran医科大学免疫遗传学研究中心,伊朗萨里

抽象

这项研究描述了两种形式的磁性DNA安徽福彩网管(MDNT)的制造技术及其作为开发比色分析平台的应用。 MDNT的第一种形式是充满磁性安徽福彩网颗粒(MNP)的DNT,第二种形式是在其外表面上被MNP脱落的DNT。然后,将两种形式的MDNT用作附着特异性胰岛素适体的平台。研究了使用这两种平台进行胰岛素测量的敏感性和准确性,并将其与酶联免疫吸附测定(ELISA)作为临床实验室中胰岛素测量的标准方法进行了比较。向MDNTs施加磁场可增强通过适体阵列在血清中捕获胰岛素的能力,随后通过去除未指定的内容物进行精确检测。为了在本研究中对胰岛素进行特异性检测及其测量,使用了具有HRP模拟活性的富含G的DNA适体,模拟了当胰岛素被适体捕获时模拟过氧化物酶的性能。 MDNT的存在具有很高的灵活性,与表面适体的连接性更大,因此这些适体可用于增加目标分子并随后增加测量的灵敏度。该比色法可用作检测任何靶分子的新型生物传感器。

关键词


介绍

由于安徽福彩网级材料的相当大的特性,可用于多种领域的安徽福彩网材料是当今医学界最大的需求之一,例如医学治疗,医学诊断和影像学领域。安徽福彩网技术的显着发展为设计和操作具有多种新功能的安徽福彩网材料提供了许多机会。 1,2.

在提高现代生物医学科学和其他生物技术领域中的安徽福彩网技术的性能和效率方面,安徽福彩网粒子具有重要意义。与它们的大规模相比,有机和无机类别的安徽福彩网颗粒均具有显着特征,包括:1)100 nm以下的非常小的尺寸; 2)高长宽比; 3)安徽福彩网级的物理和化学性质的改善 3, 4.

所有安徽福彩网颗粒都可以通过各种合成方法由有机和无机成分官能化,目的是获得适用于生物医学应用的新型安徽福彩网材料。例如,可以将诊断和医学成像的有效材料附着到无机安徽福彩网粒子的表面上,以创建具有新特性的安徽福彩网粒子。而且,这些安徽福彩网材料可以用诸如细胞受体,抗体,肽,适体和核酸的靶官能团官能化,以产生用于检测药物和化学化合物的各种目的的特定安徽福彩网结构。这类新材料称为混合安徽福彩网材料 5, 6.

实际上,杂化安徽福彩网材料由无机/有机安徽福彩网颗粒和有机官能团的两个组成部分组成,它们不仅保持良好和适当的性能,而且保持 还为治疗,诊断和成像应用提供了新特性。目标是获得具有多种功能的新安徽福彩网材料,这些材料肯定必须优先于每个组件的特性。显然,在新型安徽福彩网生物传感器的设计中,非常需要将分子探针作为检测剂附着到安徽福彩网颗粒上而得到的杂化安徽福彩网材料。 7.

同时,探针磁性安徽福彩网粒子在设计安徽福彩网生物传感器中的使用变得越来越重要,因为这些安徽福彩网粒子会随着外部磁场的积累而积累,并消除不需要的物质,从​​而可以精确地测量目标。随后,消除了对生物样品进行多步纯化和制备的需要,并且在尽可能短的时间内完成了鉴定目标分子的过程  8-10.

同时,具有高纵横比的合适平台可携带功能性亚基,在提高安徽福彩网生物传感器的最终灵敏度方面将发挥重要作用。尽管由于高的表面体积比,使用安徽福彩网颗粒一直是增加可检测分子(如适体)的运输能力的良好选择,但是随着安徽福彩网技术领域的最新进展,存在许多替代方法。携带适体或酶的功能性亚基,所有这些旨在提高生物医学传感器的最终灵敏度 11-14.

先前关于使用管状安徽福彩网结构携带酶标记(例如过氧化物酶)的研究已导致开发基于ELISA的高灵敏度诊断试剂盒。因为在这些试剂盒中,通过将酶分子附着在抗体末端的管状安徽福彩网结构表面上,发生了信号放大,其本身导致LOD降低 15-16.

随着DNA安徽福彩网技术的出现,已经开发了用于设计基于适体的传感器的新策略,以基于增加探针(如适体)的负载因子来提高目标分子的准确性和灵敏度。 17-20。在广泛的DNA安徽福彩网结构中,DNA安徽福彩网管(DNT)由于其表面对体积的比率以及在表面上承载材料和封闭材料的能力而吸引了许多制造DNA安徽福彩网结构领域的爱好者的注意。在中央频道。而且,这种安徽福彩网管的多功能性和柔韧性可以为先前讨论过的各种类型的杂化安徽福彩网材料的放置和定向提供合适的平台。 21-23.

考虑到DNTs作为运输各种分子和金属安徽福彩网颗粒的载体的最新应用,这些安徽福彩网结构的使用可为均匀加载大量适体安徽福彩网结构提供合适的平台 24-29。另外,在该安徽福彩网结构中中央通道的存在提供了包裹磁性金属安徽福彩网颗粒的能力,这是目标分子高簇的基础 30。因此,磁性DNA安徽福彩网管(MDNT)的设计和构建可以成为智能安徽福彩网结构领域的新步骤,以制造用于检测高灵敏度目标分子的基于安徽福彩网级的诊断试剂盒 29-31.

在MDNT上制备适体阵列可为设计和开发新的杂交安徽福彩网材料提供基础,该杂交材料可用于鉴定所需的生物标记物,例如本研究中的胰岛素作为目标分子(图1)。

这项研究的目的是获得设计新的比色传感平台的技术知识,该比色传感平台使用磁性DNA安徽福彩网管作为杂化安徽福彩网材料,并带有特定的低聚适体阵列来识别胰岛素。除鉴定功能外,所选择的寡适体还具有模仿过氧化物酶活性的能力,这是由于存在鸟嘌呤的富集区域,该区域在目标分子的存在下可以形成G-四链体结构。这意味着核苷酸序列可以同时显示适体在胰岛素检测中的作用,然后由于胰岛素结合而显示DNAzyme的作用。

材料和方法

化学制品

BIO-RP纯化的DNA寡核苷酸(例如biotin-5′ TGGTGGGGGGGGTTGGTAGGGTGT-CTTC3′, as a biotin-labelled G-quadruplex insulin 适体29,并由韩国Bioneer合成了24种DNA寡核苷酸作为DNA安徽福彩网管的钉书钉。另外,为了排除非特异性胰岛素结合,Bioneer用随机序列合成了对照的30聚体DNA寡核苷酸。 M13mp18噬菌体基因组和T4 DNA连接酶购自New England Biolabs(美国马萨诸塞州)。量子制备冻结‘N Squeeze DNA凝胶提取离心柱获自Bio-Rad。直径分别为100、50 nm的链霉亲和素(fluidMAG-Streptavidin)和阳离子带电磁性安徽福彩网颗粒(fluidMAG-UC / C)和Magneto PURE-Micro分离器购自Chemicell(德国)。 3 3′, 5, 5′ 四甲基联苯胺(TMB),血红素(Bioextra,来自猪),胰岛素和用于TMB底物的终止剂均购自美国西格玛。用二甲基亚砜(DMSO)(购自伊朗德黑兰的Bio Idea公司)制备了Hemin储备溶液(5 mM),该溶液在黑暗中存放于 – 20°C,并用缓冲溶液(20 mM Tris-HCl,40 mM KCl,200 mM NaCl,0.06%(v / v)Triton X-100,pH 7.4)稀释至所需浓度。将所需浓度的胰岛素溶解在结合缓冲液(20 mM Tris-HCl,140 mM NaCl,5 mM KCl,1 mM CaCl2和1 mM MgCl 2,pH 7.4)。胰岛素ELISA试剂盒购自德国Demeditec。

仪器

使用Rotor Gene Q机器(德国QIAGEN)设定折纸反应中DNA安徽福彩网管自组装的热条件。所有测定均使用来自SPL Life Science(韩国京畿道)的96孔免疫板进行。对于任何水平的加热干扰,均使用Master Cycler Personal(德国埃彭多夫)。为了摇动ELISA板,使用来自Pole Idea Pars Company(伊朗德黑兰)的旋转器430。紫外线(UV)–使用分光光度计(JenWay 6505,英国)测量可见吸收光谱。通过原子力显微镜(JPK-AFM,德国)研究了安徽福彩网管的形貌特征。透射电子显微镜(TEM)用于通过TEM EM900(德国蔡司)评估磁性DNA安徽福彩网管的尺寸和形态。

通过caDNAno模拟和建模DNA安徽福彩网管

在这项研究中,使用caDNAno软件设计所需的DNA安徽福彩网管 //cadnano.org30,31 基于DNA折纸的构建方法如以前的作者所述 ’在此简要说明的文章。将M13mp18噬菌体基因组的DNA序列作为支架链应用在软件中,以实现DNA钉的寡核苷酸序列,作为将支架链自组装成所需DNA安徽福彩网管的辅助物。钉链序列是基于它们与结合形成所需结构的支架的特殊位点的互补性确定的。在caDNAno中引入了蜂窝样式,用于在DNA折纸反应中正确折叠DNA安徽福彩网管。 21, 34。为了实现生物素功能化的DNA安徽福彩网管,在设计了安徽福彩网管并将每根短链放置在最佳位置后,将折叠后的两个末端之一的短链置于安徽福彩网管的表面这是通过5'端的生物素修饰合成的。假设这些安徽福彩网管自组装后,生物素基团出现在DNA安徽福彩网管的表面 29.

DNA安徽福彩网管的制备

生物素化的DNT是通过以前的作者文章中所述的折纸反应制备的,该折纸反应是通过将20 nM DNA支架M13mp18单链DNA和100​​ nM的每种主要寡核苷酸(表1)均稀释为1× Tris碱,乙酸和EDTA缓冲液(40 mM Tris–醋酸缓冲液(pH 8.0)和12.5 mM醋酸镁)。混合物保持在95℃°C加热5分钟,然后从95退火°C到20°C以恒定速率–1°C分钟−1 在热循环仪中。为了制造更坚固的DNT,将折纸产品与T4 DNA连接酶进行连接处理。结扎–制备了含有2的反应混合物 µl之10× T4 DNA连接酶反应缓冲液,10 µl自组装DNT,2个 µl 50%的聚乙二醇和1 µ1 T4 DNA连接酶。最后,将连接混合物在37℃下孵育°C 1小时 2134.

表面带有MNP的DNA安徽福彩网管的制备

与作者上一篇文章中所述相似,生物素化的DNT与2.5偶联。 × 10−3 mg ml−1 链霉亲和素包被的MNP,然后在37℃孵育°C持续5分钟。然后在1%琼脂糖凝胶中通过电泳从反应物中分离出安徽福彩网管。 MNP偶联的DNT的凝胶上参与的键是根据手册中的规定通过使用量子制备冷冻N挤压DNA凝胶提取离心柱来提取的 29.

通道内包裹有MNP的DNA安徽福彩网管的制备

在第一时间,完成了在通道内部包括磁性安徽福彩网颗粒的DNA安徽福彩网管的制造。使用阳离子带电荷的MNP的假设是,这些MNP具有趋向于物理吸附于DNA链的趋势,并通过与阴离子磷酸基团产生的DNA安徽福彩网管内部负电荷的交联而稳定。考虑到这一点,通过自上而下的方法制造DNA安徽福彩网管伴随并加入了阳离子带电MNP(C-MNP)的过程。为此,2.5× 10-3 将mg / ml C-MNP与DNA安徽福彩网管的折纸反应混合物混合。混合物保持在95℃oC加热5分钟,然后从95退火oC到20oC的恒定速率–1 oC / min在热循环仪中。为了制造更坚固的DNA安徽福彩网管,将折纸产品通过T4 DNA连接酶处理进行连接处理。用Magneto PURE-Micro分离器将制备的磁性DNA安徽福彩网管与简单的DNA安徽福彩网管等分离。

三种类型的DNA安徽福彩网管的电泳行为

为了评估这些安徽福彩网管的电泳行为(简单,在表面带有MNP并充满MNP)5μ将L个安徽福彩网管装载在%1琼脂糖凝胶中,并在0.5X TBE缓冲液pH 8.2的电泳实验中进行测定。使用电泳微型装置进行实验。然后将三种类型的DNA安徽福彩网管的电泳行为相互比较’s。根据手册中的说明,通过使用量子制备冷冻N挤压DNA凝胶提取离心柱,提取了DNT凝胶上参与的键。然后,通过显微镜研究对所有提取的DNT进行表征 2129.34.

三种具有原子力的DNA安徽福彩网管的显微镜表征

用原子力显微镜研究了安徽福彩网管的形貌特征。为此,5µ将L的安徽福彩网管在25℃固定在云母表面4小时oC.使用JPK-AFM(具有150 Hz IGain,0.0048 PGain和1.0 V设定点)以接触模式执行AFM。悬臂是ACTA-10探针模型。使用JPK Nano分析仪软件分析了粗略数据。

透射电子显微镜表征三种类型的DNA安徽福彩网管

透射电子显微镜(TEM)用于评估磁性DNA安徽福彩网管以及简单DNA安徽福彩网管的大小和形态。为此,将DNA安徽福彩网管通过注射器喷雾从碳层中的300目铜中固定在Agar Scientific(Stansted,Essex CM24 8GF,英国)上。 (50)。显微照片通过TEM EM900获得 29.

Fabrication of insulin G-quadruplex 适体 arrays on magnetic DNA nanotubes

二µ将M生物素标记的富含G的适体添加到表面具有抗生蛋白链菌素包被的MNP的DNT中,并于37℃孵育°C持续10分钟。将该混合物置于Magneto PURE-Micro分离器中,并用5 mM Tris缓冲液洗涤两次,以除去其他适体分子 29.

此外,对于在简单DNT和MNP封装的DNT表面上制造适体阵列,5µ加入M的抗生蛋白链菌素以混合并在37℃温育 oC在10分钟。然后2µ将M生物素标记的富含G的适体添加到表面带有抗生蛋白链菌素的DNT中,并在37°C for 10 分钟将该混合物置于Magneto PURE-Micro分离器中,并用5 mM Tris缓冲液洗涤两次以除去额外的适体分子。

Colorimetric and quantitative measurement of insulin by G-rich 适体 arrays on magnetic DNA nanotubes

加入结合缓冲液中的100 nM胰岛素,并将溶液在室温下放置40分钟,以使适体折叠–胰岛素复合物。高达150 µ的20 µ将溶于DMSO中的血红素溶液添加至混合物中,然后将其在室温下放置1小时以形成胰岛素–aptamer–血红素复合物。 A 75 µ我等分的TMB–H2O2 将其加入并在室温下孵育30分钟。然后75 µl终止试剂(H2所以 4将)加入到混合物中并记录比色变化。

Comparison of enzymatic activity of selective G-Quadruplex 适体 against insulin in conjugated and non-conjugated mode

为了测量和比较寡核苷酸适体在非共轭和共轭MNP的选择性酶活性,在提供反应混合物后,将其与表面具有MNP的磁性DNA安徽福彩网管共轭并与封装有MNP的磁性DNA安徽福彩网管共轭。含有所需的共轭安徽福彩网结构之一,血红素和胰岛素(作为目标分子),在室温下孵育45分钟,将称为TMB的着色剂添加到反应混合物中,并立即置于分光光度计中,所有在5分钟内研究了650个波长下的相关混合物,并将其作为寡适体酶活性的动力学进行了分析。另外,使用紫外线测量不具有富含G的适体寡核苷酸的混合物作为背景–可见光谱。分析结束时,75  µl终止试剂(H2所以 4)用于终止酶促反应,并在450nm处记录吸光度。

结果

装订寡核苷酸序列作为caDNA无输出,用于DNA安徽福彩网管的自组装

caDNAno软件对安徽福彩网管的计算设计如图2所示。

三种类型的DNA安徽福彩网管的凝胶电泳行为

与天然DNA(例如DNA阶梯)和简单DNA安徽福彩网管的行为相比,在通道内部或表面携带C-MNP的磁性DNA安徽福彩网管的电泳行为被颠倒了(图3)。

使用原子力显微镜(AFM)对三种类型的DNA安徽福彩网管进行显微镜表征

AFM结果还证明了三种类型的DNT的制造(图4,5.6)。 MNP的排列证明了在表面上携带MNP的DNT的制造。 MNP封装的DNT的豌豆荚状结构也证明了这一点。然而,还发现DNA安徽福彩网管中的游离C-MNP没有被包裹在安徽福彩网管中。将磁性安徽福彩网粒子同时构造封装到该管的大通道中会导致“pea-pod”在AFM地形视图中可见的安徽福彩网管通道中的粒子排列。

透射电子显微镜(TEM)表征三种类型的DNA安徽福彩网管

图7显示了不含和包含磁性安徽福彩网颗粒的DNA安徽福彩网管的TEM显微照片。安徽福彩网管呈丝状。 TEM显微照片明显证明了C-MNPs在DNA安徽福彩网管内部的包裹。估计这些安徽福彩网管的长度  ~1000 nm与 ~直径100 nm。

共轭安徽福彩网结构比色法和定量法测定胰岛素

在此阶段进行的比色观察表明,随着胰岛素检测平台的改进,反应混合物中一定浓度的胰岛素的测量已经得到了更高的准确性。通过添加TMB产生的蓝色强度和添加终止试剂改变后产生的黄色强度也得到了改善,并且此功能提高了测试的灵敏度,这非常有价值(图8)。

作为靶分子的胰岛素的敏感性和最小可测量量高度依赖于用于鉴定靶的底物。游离适体无法检测到的某些胰岛素能够通过增强诊断平台来检测和测量高灵敏度,这会影响速率。

根据结果​​,在孔中从左到右观察到的黄色变化强度显示了检测平台对灵敏度和LoD的影响。

Comparison of enzymatic activity of selective G-Quadruplex 适体 against insulin in conjugated and non-conjugated mode

这项研究的结果使用统计回归或相关统计数据,明显提高了适体的功效和适体的比色响应,从而检测并结合了在低聚适体与内部含有磁性安徽福彩网粒子的DNA安徽福彩网管结合的胰岛素位置上的胰岛素(图9) ,10)。

在一段时间内,在650 nm处的吸光度变化下,分别测量了具有过氧化物酶功能的G四联体胰岛素适体的稳态动力学,该适体以单独的形式存在,并且在MNP偶联的DNT上呈阵列排列。结果表明适体阵列的速度更高(0.0033 OD s−1)在DNT上的效果要比免费的适体的效果更好。与游离适体相比,DNT似乎可以为在其上放置适体的区域提供一个灵活的区域,以选择性地进行捕获并迅速使过氧化物酶发挥功能(图10)。

讨论

选择合适的具有高长径比的安徽福彩网载体来携带功能性亚基,将对提高安徽福彩网生物传感器的最终灵敏度起到有效的作用。以前使用管状安徽福彩网结构来运输酶标记物(例如过氧化物酶)的研究已导致获得基于ELISA的高灵敏度诊断试剂盒,因为在这些试剂盒中,通过将碳安徽福彩网管连接在抗体末端可提供高负载能力可放置大量酶分子,从而可检测到最低浓度的靶标。随着称为DNA安徽福彩网技术的现代科学的到来,已经开发了用于设计基于适体的传感器的新策略,以基于增加探针(如适体)的负载因子来提高靶分子的特异性和敏感性。

随着安徽福彩网管进入安徽福彩网技术世界,由于其结构特性,例如表面积与体积之比,直径变化的能力以及某些材料的排列能力,该领域的应用已大大改善。 ,例如表面或中央通道中的金属安徽福彩网粒子。管状安徽福彩网结构已经由多种有限材料组成,包括碳安徽福彩网管,肽安徽福彩网管,无机安徽福彩网管和DNA安徽福彩网管。这些安徽福彩网管中的每一个都可以根据性别,大小和形状而具有不同的应用,但是其中基于DNA的安徽福彩网管具有生物学起源,因此能够在生物医学领域中使用许多应用。而且,该安徽福彩网管的多功能性和柔韧性可以提供合适的平台,用于放置和定向各种类型的材料,例如先前讨论的混合安徽福彩网材料。

考虑到DNA安徽福彩网管作为转移各种分子和金属安徽福彩网粒子的载体的最新应用,这些类型的安徽福彩网结构的使用可能是均匀加载大量探针的合适平台,目的是获得更敏感和更特异性的鉴定目标分子。另外,在该安徽福彩网结构中中央通道的存在提供了放置磁性金属安徽福彩网颗粒所需的空间,这为高容量靶分子的积累提供了基础。因此,携带目标探针的磁性DNA安徽福彩网管的设计和构建在智能安徽福彩网结构领域迈出了重要的一步,以制造基于安徽福彩网级的诊断试剂盒,以高灵敏度地鉴定目标分子。为了改善设计的诊断方法的性能,由于具有磁性,所以使用氧化铁磁性安徽福彩网颗粒。

磁性DNA安徽福彩网管上的适体阵列的生产可为设计和开发用于鉴定和测量所需生物标记物(如胰岛素)的新方法提供基础。这些安徽福彩网结构基于对生物样品中胰岛素的最小检测,提供了排列高结合胰岛素能力和检测靶分子的能力。而且,通过建立磁场,在生物样品中收集胰岛素的可能性尽可能地高。随后,伴随着从患者体内分离胰岛素的过程’在洗涤步骤中,通过使用模仿模拟物被适体捕获时发生的过氧化活性的DNAzyme结构,可以去除多余的血清成分,并使检测胰岛素更准确,更灵敏。

独家IGA3适体已在本研究中被研究为识别和捕获目标分子以及过氧化模仿的催化功能的最佳特异性适体,现已被广泛研究并鉴定为胰岛素结合的专有探针,构建适量的胰岛素传感器是基于适体的。实际上,IGA3是富含鸟嘌呤的核酸。该适体的生物物理和化学研究表明,适体IGA3在其靶分子,胰岛素存在下进行鉴定和连接后,连同其用于捕获胰岛素的肠结构,富含鸟嘌呤的G-四链体结构序列区。可以在存在血红素分子的情况下模仿过氧化物酶的催化功能。

结果表明,随着胰岛素浓度的增加,反应混合物的吸收强度显着增加。实际上,通过该系统的设计,富含G的适体发挥了两个作用。首先,它用作识别和识别目标分子的认知元素,并继续创建G-四链体的结构,然后继续传递可将分析物的识别和捕获转变为可识别信号的信号传输元素。此功能对于生物传感器的设计可能非常重要,因为根据该模型,如上所述,生物传感器的两个重要部分,一方面是由于在一定程度上被寡聚适体替代抗体而降低了成本,具有更高的特异性,敏感性和准确性,以及合成的简易性,热稳定性和非免疫性。

当然,对于本研究中研究的四种胰岛素测量方法的比较,很明显,设计用于通过在表面带有MNP的磁性DNA安徽福彩网管检测胰岛素的灵敏度比检测相对于游离胰岛素的灵敏度要高。认为低聚物在反应混合物中是游离的,甚至与铁安徽福彩网颗粒处于共轭状态。由于处于游离状态的低聚适体与胰岛素意外碰撞的可能性较小,因此作为形成G-四链体结构的介绍而形成合适的碗状结构,因此它们无法检测目标分子,从而降低了正确测量胰岛素的可能性。另外,反应介质中的游离适体可具有任何二级结构,这导致在处理靶分子(胰岛素)时缺乏适当的结构。

如果将适体连接到反应混合物中MNP的表面,则与DNA安徽福彩网管表面上的其他适体阵列相比,胰岛素水平降低的原因是安徽福彩网颗粒区域积聚的可能性和用于结合和鉴定胰岛素的适体的可用性。但是比较DNA安徽福彩网管表面的两个安徽福彩网级适体阵列显示,当将适体放置在DNA安徽福彩网管上且表面包裹有MNP时,在表面上会有更多的适体用于检测胰岛素。因为对于链霉抗生物素蛋白的每个分子作为将生物素化的适体结合到DNA安徽福彩网管表面的桥梁,所以有自由的第三位连接适体。在胰岛素适体的特定分离物与表面结合MNP的DNA安徽福彩网管偶联的情况下,由于安徽福彩网颗粒在表面的排列并与这些安徽福彩网颗粒的大小成正比,因此它们产生的空间抑制作用会减少可用的适体并减少胰岛素结合。因此可以认为,在其中心通道中包含磁性氧化铁安徽福彩网粒子的DNA安徽福彩网管的结构可以为设计和开发用于靶向多种目标生物的传感器(包括电化学,比色法和光谱学)中的目标分子提供合适的基础。

致谢

作者还感谢Mazandaran医科大学的中央研究实验室和伊朗安徽福彩网技术计划(INI)。

利益冲突

作者宣称没有利益冲突。

资金

伊斯法罕大学(批准号:A / 40284/94)和马赞丹兰医学大学(批准号:1271/93)得到了这项研究的支持。

 

 
18岁 Adabi,M.使用电化学适体传感器检测铅离子,安徽福彩网医学研究杂志。 4。 2019,247-252。